Pubblicazioni TRPS - Approfondimenti sui parametri fisici delle nanoparticelle in campioni biologici, prodotti farmaceutici, ecc...

Ad oggi, la diffusione transsinaptica delle taupatie nella malattia di Alzheimer è stata studiata utilizzando modelli animali o in vitro. In uno studio pubblicato sulla pubblicazione Nature Laboratory Investigation, Miyoshi et al. (2021) descrivono un saggio di citometria a flusso per quantificare la depolarizzazione dei terminali neuronali sinaptici umani isolati, noti come sinaptosomi. I sinaptosomi sono considerati un sistema modello rilevante per lo studio della disfunzione sinaptica umana nelle malattie neurodegenerative e sono stati isolati dal cervello umano dopo l'autopsia (56 casi con diagnosi variabili: principalmente AD con condizioni aggiuntive come angiopatia amiloide cerebrale e aterosclerosi e tre controlli).

Utilizzando il modello ex vivo, il gruppo ha osservato un rilascio di EV indotto dalla depolarizzazione, insieme a marcatori EV di tetraspanina. Gli EV rilasciati dalle sinapsi neurali sono stati caratterizzati utilizzando diversi metodi, tra cui la TRPS, per l'analisi delle dimensioni (confermando che gli EV erano nell'intervallo di dimensioni coerenti con gli esosomi) e Western blot che mostravano il CD63 della tetraspanina e deboli bande tau. L'attività di semina della tau esosomiale è stata potenziata dall'amiloide-β, come misurato da un biosensore tau basato su fluorescence resonance energy transfer (FRET). Gli autori hanno concluso che lo studio è coerente con l'amiloide-β come patologia iniziale a monte e può fornire supporto per approcci terapeutici mirati alla tau e inibitori dell'aggregazione, inclusa una riduzione della secrezione di sottopopolazioni esosomiali portatrici di tau.

Nell'ambito di rigorose valutazioni sulla sicurezza e sull'immunogenicità dei prodotti biofarmaceutici, le agenzie di regolamentazione spesso incoraggiano la caratterizzazione delle particelle submicroniche. Come metodo adatto all'analisi di campioni con distribuzioni granulometriche eterogenee, le potenzialità della TRPS sono state valutate da Bayer AG e dall'Università Ludwig Maximilian di Monaco, quando applicate a soluzioni di biofarmaci. I campioni sono stati preparati applicando "stir-stress" agli anticorpi monoclonali IgG (mAbs) per indurre l'aggregazione, e sono stati filtrati attraverso un filtro a membrana da 5 µm per rimuovere i grandi aggregati che avrebbero bloccato il nanoporo. È stato applicato un approccio "spiking-in" per introdurre una concentrazione di elettrolita sufficiente per condizioni di misurazione stabili. Gli autori hanno confermato le potenzialità della TRPS per questa applicazione, e hanno suggerito questo nuovo approccio per la valutazione dei dati di simili campioni proteici.