Sistema FluidFM CRISPR

Rilascia i tuoi complessi CRISPR-Cas dove sono necessari: nel nucleo

Progettato per farmacologi e biologi molecolari, il sistema FluidFM CRISPR è la soluzione più affidabile e adatta per modificare il genoma delle cellule aderenti.
A differenza dei tradizionali metodi di trasfezione, questo sistema beneficia della possibilità di richiedere solo un piccolo numero di cellule di partenza grazie all'elevata vitalità e all'efficienza di trasfezione anche su tipi di cellule particolarmente difficili da trasfettare.

Con il sistema CRISPR, puoi passare facilmente sopra alle membrane citoplasmatiche e nucleari e rilasciare il materiale direttamente nel nucleo, assicurandoti che i complessi CRISPR-Cas e il template di riparazione raggiungano i loro obiettivi. Ciò aumenta la possibilità che si verifichino eventi HDR (Homology directed repair).

Con la funzione integrata Volume Calculator il FluidFM CRISPR calcola con precisione il numero di complessi erogati e ottimizza il dosaggio per massimizzare il target e minimizzare eventuali effetti del target.
Esegui l'editing multiplex: rilascia tutti i gRNA che vuoi in un singolo nucleo, in una singola iniezione.

Caratteristiche del sistema
  • Iniezione intracellulare selettiva, diretta e delicata
    Seleziona con precisione singole cellule in base al loro fenotipo e distribuisci con le nanosiringhe FluidFM (apertura 600 nm) complessi CRISPR-Cas esattamente dove serve: il nucleo. La membrana della cellula si richiude istantaneamente quando la nanosiringa viene retratta, determinando una vitalità cellulare superiore al 95%.
  • Semplice e Intuitivo
    Approfitta della preparazione semplice e della totale automazione e gestione dei dati, combinata con il nostro software semplice e intuitivo. Basta puntare tramite il mouse il sistema sul citoplasma o sul nucleo delle cellule sulle quali si desidera lavorare e cliccare su "OK". Semplicissimo.
  • Calcolo del volume
    Calcola con precisione il numero di complessi consegnati con la funzione integrata di calcolo del volume. Una funzionalità particolarmente utile quando si desidera ottimizzare il dosaggio per massimizzare il target e minimizzare eventuali effetti del target.
  • Microscopia in fluorescenza integrata
    • Sorgente di luce fluorescente: 130 W Hg illuminazione della luce della guida
    • Torretta motorizzata con 8 posizioni, otturatore integrato, struttura impermeabile; cubi per fluorescenza a singola banda:
      • (EF: Filtro Eccitatore, BS: Beam splitter, BF: Filtro di sbarramento)
      • Rosso: EF: 527 - 552 nm, BS: 565 nm, BF: 577 - 632 nm
      • Verdse: EF: 465 - 495 nm, BS: 505 nm, BF: 515 - 555 nm
      • Blu: EF: 360-370 nm, BS: 410 nm, BF: 420-460 nm
    • Illuminatore a fluorescenza: Design lineare con diaframma di campo
      pEGFP-UHRF1 and pmCherry-TRIM21 (2 plasmids) coinjected into CHO-K1 cells
      pEGFP-UHRF1 e pmCherry-TRIM21 (2 plasmids) coiniettate in cellule CHO-K1
  • Compatibile con piastre standard per pozzetti per coltura cellulare
    L'ampio stage XY del sistema può ospitare piastre di pozzetti standard delle principali marche, fino a un massimo di 24 pozzetti.
  • Ambiente cell-friendly 
    Esegui esperimenti nel contesto della coltura cellulare, senza alcun problema. L'incubatrice è completamente chiusa, con controllo della temperatura e sistema HEPA-Filter, progettato su misura intorno al sistema CRISPR.

    Specifiche:

    • Custodia in policarbonato nero ottimale per imaging di fluorescenza ottimale
    • Sistema integrato di controllo della temperatura ad alta precisione
    • Sistema integrato di controllo del flusso d'aria
    • Filtro antiparticolato ad alta efficienza (HEPA) di lunga durata
    • 2 lampade di decontaminazione UV da 10 W con monitoraggio automatico del ciclo di vita e timer
    • 4 sorgenti luminose bianche a LED
    • Porte su misura per un facile accesso al sistema CRISPR e al microscopio
    • Consumo energetico 620 W


      Funzionalità extra: ambiente controllato in CO2 (disponibile a breve)

      Quando un media indipendente dalla CO2 non è un'opzione praticabile, il controllo della concentrazione di CO2 nell'atmosfera è cruciale. Perciò è consigliabile dotare l'incubatrice di capacità di controllo della CO2.
      Incubator V3.6 without camera

  • Protocolli di iniezione validati
    Richiedi l'accesso al database Cytosurge di protocolli di iniezione validati.
  • Osserva e approfondisci
    Il software Cytosurge registra le coordinate XY delle celle modificate e consente all'utente l'osservazione a lungo termine delle celle modificate con le impostazioni desiderate (filtro a fluorescenza, tempo di esposizione ecc ...). Osserva qualsiasi punto di tuo interesse e segui lo svolgersi degli eventi con i time-lapse multicanale.
  • Risparmia sui costi dei materiali
    Per effettuare nanoiniezioni in migliaia di cellule basta 1 ml di soluzione di CRISPR-Cas.
Software

Punta e clicca

Prendendo come riferimento l'immagine ad alta definizione delle cellule presentata a schermo, si possono scegliere le cellule di interesse in base al loro fenotipo. È possibile selezionare centinaia di cellule sotto controllo visivo, selettivamente in merito al nucleo o a citoplasma

Procedure semplici

  • Segui le istruzioni suggerite passo-passo dal software per consegnare in modo ottimale i tuoi complessi CRISPR-Cas nel nucleo

  • Applica le impostazioni di iniezione consigliate dal database dei protocolli

  • Adatta facilmente i parametri di iniezione alle tue cellule modificando alcuni parametri (pressione di iniezione, tempo di iniezione, forza esercitata e velocità di avvicinamento)

  • Infine, lascia che il sistema CRISPR consegni autonomamente i complessi CRISPR-Cas

Dai seguito al tuo esperimento

Istruisci il sistema per l'acquisizione delle immagini necessarie utilizzando le tue impostazioni preferite, in pochi clic. Vedi tutti i dati rilevanti raggruppati per le coordinate di ogni cellula.

Calcolatore di volume - Funzionalità integrata

 Semplicemente seleziona le immagini delle cellule modificate e segui le istruzioni passo-passo sullo schermo per ottenere il volume reale iniettato.

Ripetibilità

In qualsiasi momento puoi ritrovare  le cellule modificate o che avevi scelto e puoi persino ripetere l'iniezione in una medesima cellula.

Consumabile - Nanosiringa FluidFM

Sviluppato per l'iniezione in singole cellule: l'apice molto appuntito e l'apertura di circa 600 nm sulla punta a forma di piramide della nanosiringa FluidFM consentono un'iniezione delicata che non va a compromettere la vitalità cellulare e che consente di lavorare con composti caratterizzati da diversi pesi e diverse densità molecolari. La nanosiringa FluidFM può essere caricata con qualsiasi liquido con viscosità da 1 a 10000 cP (dall'acqua al miele).

  • Diverse linee cellulari: ideali per cellule aderenti di mammiferi come CHO, HeLa, HEK
  • Affidabile: è possibile iniettare in migliaia di cellule con la stessa nanosiringa
  • Maneggevole: scambio automatico dei consumabili e funzioni di lavaggio
  • Informazioni approfondite: verifica della forma reale di ogni nanosiringa in uso tramite l'immagine SEM scaricabile con il QR-Code stampato sul blister
  • Serbatoio da 1 µl: riduzione della quantità di reagente. Per iniettare in migliaia di cellule è necessario solo 1 µl di soluzione CRISPR-Cas

Specifiche tecniche

  • Diametro dell'apertura: 600 nm
  • Forma della punta e dell'apertura: apertura laterale piramidale
  • Costante elastica disponibile: 2 N / m
  • Dimensioni della sonda: lunghezza 200 µm, larghezza 36 µm, altezza 1 - 2,5 µm, altezza della piramide 7 µm